Introdução
A rHuEPO é uma glicoproteína que tornou-se comercialmente disponível na
década de 80, após evidências de que o hormônio poderia minimizar a
necessidade da transfusão de sangue, bem como, melhorar o bem estar de
pacientes anêmicos com doença renal crônica (CHOI et al., 1996).
Após os Jogos Olímpicos de Inverno de Calgari e Jogos Olímpicos de Seul, a
rHuEPO passou a ser abusivamente utilizada por atletas, com o intuito de
melhorar o seu desempenho físico (CAZZOLA, 2002; RIVER, SAUGY, 1999).
Em 1990, tal prática foi oficialmente proibida pelo COI (CAZZOLA, 2002; RIVER;
SAUGY, 1999), no entanto, alguns fatores facilitam a utilização indiscriminada
da rHuEPO no âmbito esportivo, principalmente pela dificuldade de detecção e
diferenciação da rHuEPO da EPO endógena, em virtude da sua complexidade
estrutural com elevada massa molecular, presente em baixas concentrações nos
fluidos biológicos e bastante semelhante à sua forma endógena (GAREAU et
al.,1995; MAGNANI et al., 2001), e ainda, pela técnica natural por hipóxia
intermitente, que aumenta a produção de EPO no sangue (SANCHIS-GOMAR, 2009;
BALESTRA; GERMONPRÉ, 2010).
Em relação aos efeitos da rHuEPO sobre o
desempenho físico, alguns estudos demonstraram que além
de sua capacidade inerente de estimular a produção de hemácias e de
hemoglobina (SCHMIDT et al., 2003), o tratamento
com rHuEPO, em diferentes doses, pode aumentar o VO2máx
e o tempo de exaustão em humanos (AUDRAN, 1999; EKBLOM, BERGLUND, 1991;
BIRKELAND et al., 2000). No entanto, estes efeitos ainda não são
conclusivos, necessitando de novas investigações relacionadas a este assunto.
Neste sentido, o presente estudo objetivou verificar a influência do tratamento
com rHuEPO sobre o desempenho físico de ratos submetidos ao treinamento físico
aeróbio, com cargas progressivas, durante seis semanas.
Metodologia
Animais
O estudo foi realizado baseando-se nos Princípios Éticos de Experimentação
Animal adotado pelo Colégio Brasileiro de Experimentação Animal (COBEA) e foi
aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA), da Universidade do
Vale do Paraíba (UNIVAP) (Protocolo de nº A032/CEUA/2011).
Foram utilizados 14 ratos Wistar machos, onde foram mantidos
coletivamente em caixas plásticas, com alimentação composta de água e
ração ad libitum. Os animais ficaram mantidos no biotério do
Laboratório de Fisiologia e Farmacologia do Instituto de Pesquisa e
Desenvolvimento (IP&D), da UNIVAP, em temperatura de 22º a 25º C, umidade
relativa e luminosidade controlada - ciclo claro e escuro de 12 horas.
Os 14 animais foram divididos aleatoriamente em grupo treinado (GT) (n=7) e
grupo treinado + rHuEPO (GT+rHuEPO) (n=7).
Treinamento
físico e teste de carga máxima
Antes de iniciar o treinamento com carga, os animais foram adaptados ao meio
líquido, visando reduzir o estresse físico (LEITE et al., 2011).
O treinamento aeróbio foi composto pelo aumento progressivo de 10% da
sobrecarga determinada pelo TCM, a cada duas semanas, cinco sessões de treino
em cada, durante 30 minutos por dia (Tabela 1).
Tabela
1. Protocolo de treinamento físico aeróbio
O TCM iniciou com sobrecarga de 5% do peso corporal, seguido de um aumento de 1%
de carga, a cada 3 minutos de natação. Assim que o animal afundasse, não
retornando a superfície após 10 segundos, o teste era então interrompido e a
carga anterior, considerada a máxima (OSORIO et al., 2003).
O TCM foi aplicado antes de iniciar o protocolo experimental (TCM1), após três
semanas (TCM2) e ao final do protocolo (TCM3).
Tratamento
Os animais receberam injeções de rHuEPO (Blausiegel, Eritromax®), por via
subcutânea, na região dorsal (nuca), em três dias de cada semana, durante
seis semanas. A dose administrada foi de 50UI/Kg nas três primeiras semanas e
20UI/Kg nas três últimas (POUX et al., 1995; RUSSELL et al., 2002). A cada 15
dias os animais receberam por via oral, 2,4 mg de ferro (RUSSELL et al., 2002).
Resultados
Na figura 1 são apresentados os valores médios ± DP do percentual de
carga (%) do GT e GT+rHuEPO dos três TCM aplicados
durante protocolo experimental, em que o primeiro teste foi aplicado antes de
iniciar o protocolo de treinamento e/ou administração da rHuEPO (TCM1), após
três semanas (TCM2) e ao final do protocolo (TCM3).
Pode-se observar que houve diferença estatística entre o TCM1 vs TCM2 e
TCM1 vs TCM3 tanto do GT (p<0,01), quanto do GT+rHuEPO (p<0,01).
Houve diferença estatística entre o TCM3 do GT comparado ao TCM3 do GT+rHuEPO
(p<0,05).
Figura
1. Valores médios ± DP do percentual de carga
(%) do GT (n=7) e GT+rHuEPO (n=7), durante TCM aplicado
antes de iniciar
o
protocolo de treinamento e/ou administração da rHuEPO (TCM1), após quatro
semanas (TCM2) e ao final do protocolo (TCM3).
*
Estatisticamente diferente em relação ao TCM1 vs TCM2 e TCM1 vs
TCM3 do GTAI (p<0,01) e GTAI+rHuEPO (p<0,01);
#
Estatisticamente diferente entre TCM3 do GT vs TCM3 do GT+rHuEPO
(p<0,05).
Discussão
Através dos valores de percentual de carga apresentados durante o TCM, antes,
durante e após protocolo de treinamento e/ou tratamento com rHuEPO, pode-se
observar que ambos os grupos apresentaram evolução relacionada ao percentual
de carga, entre cada teste, e ainda, que o grupo treinado e tratado no TCM3 foi
significativamente superior ao GT.
Denota-se que no TCM1, aplicado antes de iniciar o protocolo experimental, o GT
alcançou valor médio de carga de 8% e o GT+rHuEPO 7,4%. Os animais neste
primeiro teste nadaram com cargas muito semelhantes, em razão do cálculo,
considerando 5% do peso corporal (GT - 306,3 ± 5,3 g; GT+rHuEPO - 306 ± 3,4
g).
Após três semanas de treinamento e tratamento realizou-se o TCM2, onde ambos
os grupos apresentaram valores significativamente maiores em relação ao TCM1.
É importante destacar que o GT+rHuEPO iniciou o TCM2 com cargas superiores, em
virtude do maior peso corporal apresentado (347 ± 13 g), quando comparado ao
peso corporal do GT (340 ± 12,8 g). Ainda assim, o GT+rHuEPO evoluiu 2,4% e o
GT somente 1%, em relação ao TCM1 e TCM2.
Esta evolução entre cada TCM deve-se evidentemente ao treinamento
físico que pode promover, de acordo com sua especificidade, tanto efeitos
relacionados ao conteúdo hematológico (BAKER et al.
2011; FREITAS et al., 2010; MARTINEZ-BELLO et al., 2011), quanto
adaptações musculares, envolvendo os efeitos angiogênicos,
alterações de receptores de EPO, aumento no
número e tamanho das mitocôndrias, e ainda maior
conteúdo de mioglobina (DALIA et al. 2011;
FOSS; KETEYIAN, 2000; WILMORE et al., 2010).
Em relação ao TCM3 o percentual de carga do GT+rHuEPO foi significativamente
superior ao do GT. Os resultados do TCM indicam que a rHuEPO potencializou o
desempenho aeróbio dos animais, corroborando com estudos que encontram aumento
do tempo de exaustão e do VO2máx,
em indivíduos submetidos ao mesmo tratamento (LUNDBY et al., 2008;
RUSSELL et al., 2002; THOMSEN et al., 2007).
Um dos fatores que ajuda a explicar a melhora do desempenho físico em virtude
do tratamento com rHuEPO é o aumento de glóbulos vermelhos no sangue, que pode
aumentar o VO2máx.
No entanto, estudos demonstraram que os efeitos da rHuEPO
estendem-se além das alterações relacionadas à eritropoiese
(CAYLA et al., 2008; CHRISTENSEN, 2011; ROBACH et
al., 2009), de modo que este hormônio recombinante, pode também promover
outras alterações, tais como, redução da concentração de lactato
sanguíneo (CONNES et al., 2004; LAVOIE et al., 1998; MEIERHENRICH
et al., 1996; RUSSEL et al., 2002) e de proteínas musculares
(JUEL et al., 2007; LUNDBY et al., 2008).
Além desses efeitos, recentemente foi relatado que o tratamento com rHuEPO
pode atravessar a barreira sangue-cérebro, provocando efeitos neurais,
podendo assim potencializar o desempenho físico, sem necessariamente alterar a
produção de células vermelhas do sangue (SCHULER et al., 2012).
Conclusão
Os resultados mostraram que o tratamento com rHuEPO,
durante seis semanas, pode aumentar o desempenho físico de ratos treinados
aerobicamente com intensidade progressiva.
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